טור כרומטוגרפיה של ג'ל חדירה
2. עמוד כרומטוגרפי (סוג סיבוב)
3. טור כרומטוגרפי (מדריך)
*** מחירון עבור מלא לעיל, ברר מאיתנו להגיע
תיאור
פרמטרים טכניים
טור כרומטוגרפיה של ג'ל חדירה(טור GPC בקיצור) הוא רכיב הליבה של כרומטוגרפיה של ג'ל חדירה (GPC לטכנולוגיה קצרה). GPC, כטכניקת כרומטוגרפיה נוזלית יעילה, פותחה על ידי J. בשנת 1964 C. מאז הצלחת המחקר של מור, הוא מילא תפקיד חשוב בתחומים שונים של מדעי הפולימר. זה היה בשנת 1964, מאת ג'יי סי מור היה הראשון שערך בהצלחה מחקר. לא רק שניתן להשתמש בו להפרדה וזיהוי של חומרים מולקולות קטנות, אלא ניתן להשתמש בה גם לניתוח הומולוגים פולימריים עם אותם תכונות כימיות, אלא נפחים מולקולריים שונים (פולימרים מופרדים על עמוד ההפרדה על פי נפח הדינמיקה המולקולרית שלהם גוֹדֶל).
 |
 |
 |
 |
(1) כל הרכיבים מחויבים לפני חיסול מולקולה ממס, עם זמן הפרדה קצר.
(2) זה יכול לחזות את זמן ההתחלה ולאפשר הזרקה רציפה.
(3) תהליך ההפרדה של כרומטוגרפיה של ג'ל אינו מסתמך על כוחות בין -מולקולריים.
(4) זמן שמירה קצר, שיא כרומטוגרפי צר, קל לאיתור.
באופן כללי, לא מולקולות שנשמרו מאוד מצטברות בעמודה הכרומטוגרפית, ולכן רכיבי הדגימה לא יאבדו במהלך ההפרדה, וגם חיי השירות של העמודה יורחבו.
פָּרָמֶטֶר
עקרונות בסיסיים
עקרון ההפרדה
ג'ל אינרטי כימית,טור כרומטוגרפיה של ג'ל חדירהאין ספיחה, הפצה וחילופי יונים. תן לפיתרון הפולימר המדוד לעבור דרך עמוד כרומטוגרפי עם גדלי נקבוביות שונים, כאשר המסלולים הזמינים למולקולות לעבור דרך העמוד כוללים פערים בין חלקיקים (גדולים יותר) ודרך חורים בתוך חלקיקים (קטנים יותר). כאשר תמיסת הפולימר זורמת דרך העמוד הכרומטוגרפי (חלקיקי ג'ל), מולקולות גדולות יותר (גדולות יותר מנקבוביות ג'ל בנפח) אינן נכללות בנקבוביות החלקיקים, ויכולות לעבור רק דרך הפערים בין חלקיקים בקצב מהיר יותר; מולקולות קטנות יותר יכולות להיכנס לנקבוביות הקטנות בחלקיקים בקצב איטי בהרבה; מולקולות בנפח בינוני יכולות לחדור לנקבוביות גדולות יותר, אך הן מונעות על ידי נקבוביות קטנות יותר, ונופלות בין שני המצבים שהוזכרו לעיל. [1] לאחר שעברו אורך מסוים של עמוד כרומטוגרפי, מולקולות מופרדות על פי המשקל המולקולרי היחסי שלהן, כאשר אלה עם משקל מולקולרי יחסית גבוה יותר מקדימה (כלומר זמן חיסול קצר יותר) ואלה עם משקל מולקולרי יחסית נמוך יותר מאחור ( כלומר זמן חיפוש ארוך יותר). הנפח הכולל של שטיפה שהתקבל מהמדגם שנכנס לטור להדחה נקרא נפח הדגימה. לאחר קביעת המכשיר והתנאים הניסויים, נפח החיסון של המומס קשור למשקל המולקולרי שלו, וככל שהמשקל המולקולרי גדול יותר, כך נפח ההתחשבות קטן יותר.
(1) הרחקת נפח
(2) דיפוזיה מוגבלת
(3) הפרדת זרימה
עקרון תיקון
עקומת כיול נוצרת מראש באמצעות פולימר סטנדרטי מונו -פיסרי עם משקל מולקולרי יחסית ידוע, התואם לנפח ההתחלה או לזמן החשמל ולמשקל המולקולרי היחסי. כמעט ולא ניתן למצוא דגימות סטנדרטיות מונודיסטריות בפולימרים, ובדרך כלל משתמשים בדגימות חלוקה צרות במקום זאת. באותם תנאי בדיקה, נוצרה סדרה של ספקטרום סטנדרטי של GPC, המתאימה לזמני השמירה של דגימות עם משקולות מולקולריות יחסית שונות. העקומה המתקבלת על ידי תכנון LGM נגד T נקראת "עקומת הכיול". על ידי תיקון העקומה, ניתן לחשב משקולות מולקולריות יחסית נדרשות וניתן לחשב התפלגות משקל מולקולרי יחסית מספקטרום ה- GPC. אין הרבה סוגים של פולימרים שיכולים לייצר דגימות סטנדרטיות בפולימרים. ללא דגימות סטנדרטיות, אי אפשר לקבל עקומות כיול לפולימרים, ואי אפשר גם להשיג את המשקל המולקולרי היחסי ואת התפלגות המשקל המולקולרי היחסי של פולימרים בשיטות GPC. לשם כך ניתן להשתמש בעקרון התיקון האוניברסלי.
עקרון כיול אוניברסלי
בשל העובדה ש- GPC מפריד בין פולימרים המבוססים על נפח דינמיקה של נוזל מולקולרי, מה שאומר שאותו נפח דינמיקה של נוזלים מולקולריים, הוא זורם באותו זמן שמירה, וכתוצאה מכך נפח דינמיקת נוזלים זהה.
נפח הדינמיקה הנוזלי של שני סוגים של שרשראות גמישות זהה:
אם ידועים ערכי K ו- Alpha של הדגימה הסטנדרטית והפולימר המדוד, ניתן לכייל את המסה המולקולרית היחסית של הדגימה באמצעות מדגם סטנדרטי עם מסה מולקולרית יחסית ידועה
קטע ניסיוני
 |
 |
 |
שיטה ישירה:
במקביל למדידה של הצמיגות או פיזור האור של ריכוז ההרכבה כדי לקבוע את משקלו המולקולרי.
שיטה עקיפה:
בעזרת קבוצה של דגימות מונודיססיסיות עם משקולות מולקולריות משתנות כדגימות סטנדרטיות, ניתן למדוד בנפרד את נפח החיסון והמשקל המולקולרי שלהם כדי לקבוע את הקשר בין השניים.
מַכשִׁיר
טור כרומטוגרפיה של ג'ל חדירהמכשיר מורכב ממערכת משאבות, (אוטומטית) מערכת דגימה, עמוד כרומטוגרפי ג'ל, מערכת איתור ומערכת רכישת ועיבוד נתונים.
1.1. מערכת משאבה:כולל מיכל אחסון ממס, קבוצה של מכשירי גזז ומשאבה בלחץ גבוה. תפקידו לגרום לשלב הנייד (ממס) לזרום לטור הכרומטוגרפי בקצב זרימה קבוע. מצב העבודה של המשאבה משפיע ישירות על דיוק הנתונים הסופיים. ככל שהמכשיר מדויק יותר, נדרש מצב העבודה של המשאבה יציב יותר. שגיאת קצב הזרימה הנדרשת צריכה להיות פחות מ- 0. 01ml/min.
1.2. עַמוּדָה:רכיב הליבה להפרדת מכשירי GPC. זה להוסיף חלקיקים עם גדלי נקבוביות שונים כמילוי לצינור נירוסטה חלול. לכל טור כרומטוגרפי יש מגוון מסוים של הפרדת משקל מולקולרי יחסית ומגבלת חדירות, ויש גבולות עליונים ונמוכים לשימוש בעמודים כרומטוגרפיים. הגבול העליון לשימוש בעמודה הכרומטוגרפית הוא שכאשר גודל המולקולה הקטנה ביותר של הפולימר גדול יותר מגודל הג'ל הגדול ביותר בעמודה הכרומטוגרפית, הפולימר לא יכול להיכנס לגודל הנקבוביות של חלקיקי הג'ל, וכולם של הוא זורם בחלק החיצוני של חלקיקי הג'ל, שאינו משיג את המטרה של הפרדת פולימרים עם משקולות מולקולריות יחסית שונות. יתר על כן, ניתן לחסום את נקבובית הג'ל, שתשפיע על השפעת ההפרדה של העמודה הכרומטוגרפית ולהפחית את חיי השירות שלה. הגבול הנמוך יותר לשימוש בעמודים כרומטוגרפיים הוא שכאשר גודל השרשרת המולקולרית המרבית בפולימר קטן יותר מגודל הנקבוביות המינימלי של נקבובית הג'ל, המטרה של הפרדת משקולות מולקולריות יחסית שונות אינה מושגת. לכן, כאשר משתמשים בכרומטוגרף ג'ל כדי לקבוע את המשקל המולקולרי היחסי, יש צורך לבחור תחילה את העמודה הכרומטוגרפית התואמת את טווח המשקל המולקולרי היחסי.
1.3. מילוי (מילוי ייבחר על פי הממס המשמש, והדרישה הבסיסית למילוי היא שלא ניתן להמיס את המילוי על ידי ממס):ג'ל קלקר צולב (חלים על ממס אורגני, עמיד בפני טמפרטורה גבוהה), ג'ל פוליוויניל אצטט מקושר חוצה (עד 100 מעלות, החל על ממיסים קוטביים כמו אתנול ופרופנון) כדור סיליקון נקבובי (החל על מים וממס אורגני), זכוכית נקבובית, תחמוצת אלומיניום נקבובית (חלה על מים וממס אורגני)
1.4. עַמוּדָה:זכוכית, נירוסטה
1.5. מערכת גילוי:גלאי אוניברסלי: מתאים לגילוי כל הפולימרים והתרכובות האורגניות. ישנם גלאי רפרקטומטר דיפרנציאלי, גלאי ספיגה אולטרה סגולה וגלאי צמיגות.
1.6. גלאי רפרקטומטר דיפרנציאלי:מדד השבירה של הממס צריך להיות שונה ככל האפשר מזה של המדגם שנמדד.
1.7. גלאי ספיגת UV:לממס אין ספיגה חזקה בסמוך לאורך הגל הקליטה האופייני של המומס.
1.8. גלאי סלקטיבי:מתאים לפולימרים גבוהים ותרכובות אורגניות שיש להם תגובה מיוחדת לגלאי. ישנם UV, IR, פלואורסצנציה, גלאי מוליכות וכו '.
מִבצָע
2.1. בחירת ממיסים:מסוגל להמסת פולימרים שונים; לא ניתן לאשש רכיבי מכשירים; תואם את הגלאי.
2.2. שילוב פיזור אור לייזר עם כרומטוגרף ג'ל:אנו יכולים להשיג לא רק את ספקטרום הריכוז, אלא גם את הספקטרום של פיזור עוצמת האור לעומת נפח הדריכה, כדי לחשב את עקומת חלוקת המשקל המולקולרית ומשקולות מולקולריות ממוצעות שונות של הדגימה כולה.
2.3. בניסויים לפיזור אור לייזר: טור כרומטוגרפיה של ג'ל חדירות ג'לנחוץ כדי להסיר בקפדנות אבק מהמדגם. אבק בתמיסה יכול לגרום לפיזור אור חזק, ולהפריע ברצינות למדידת פיזור האור בתמיסות פולימר. הסרת אבק פתרון היא המפתח להצלחה או לכישלון של פיזור אור. ראשית, נדרשת הסרת אבק ממס. יש לזקק את הממס המשמש להכנת דגימת הבדיקה ולסנן דרך {{0}}. 2 מיקרומטר קרום אולטרה -סילטרציה לפני השימוש. יש לסנן את הפיתרון המוכן דרך קרום אולטרה -סינון 0.2 מיקרומטר. בנוסף, יש להשרות את המכשירים המשמשים במבחן, כמו מזרקים, לשטוף חומר ניקוי ולשטוף נמרצות במים לפני השימוש.
תגיות פופולריות: טור כרומטוגרפיה של ג'ל חדירה, יצרני עמודות כרומטוגרפיה של סין ג'ל, ספקים, מפעל
שלח החקירה
