כרומטוגרפיה של טור קלאסי

כרומטוגרפיה של טור קלאסי, המכונה גם כרומטוגרפיה נוזלית-סולידית, היא טכניקה להפרדת מומסים המבוססים על ההבדל בהפצה בין שלב נייח (בדרך כלל ספיגה מוצקה) ושלב נייד (ממס) {}}} העיקרון הבסיסי ניתן לסיכום של הפרדה בעזרתם של התערובת, בעזרת התערובת המפרדת, ומפרק את התערובת, והפרדונטים של התערובת, והפרדונטים, ומרכיב, ומגורים, ומדובר במתחם, ומרכיב, ומגורים, ומגורים הם, מקדמי ההפצה השונים בין השלב הקבוע לשלב הנייד .

In column chromatography, the stationary phase is usually composed of porous particulate matter (such as silica gel, alumina, activated carbon, etc.), which has a large specific surface area and adsorption center, and can form hydrogen bonds with solute molecules, van der Waals forces and other interactions, resulting in adsorption. The mobile phase is responsible for elution of מולקולות מומסים מהשלב הנייח, ויש לקבוע את בחירתו בהתאם לקוטביות המומס ומאפייני הספיחה של הספיגה .

In the separation process, the mixture solution is introduced into the column containing the stationary phase. With the flow of the mobile phase, the components move down the column at different speeds due to the different adsorption capacity of the stationary phase. The more polar components are usually easy to be adsorbed by the stationary phase, so they move slowly. However, the component עם קוטביות חלשה נסחף בקלות על ידי השלב הנייד, ומהירות הנעים מהירה יותר . בדרך זו, כל רכיב יוצר מספר רצועות צבע בעמודה כדי להשיג הפרדה.

► מטרת הטיפול הנגזר
המטרה העיקרית של הגזירה היא לשנות את המאפיינים הפיזיקו -כימיים של אנליטים כך שהם מתאימים יותר להפרדה וגילוי על ידי כרומטוגרפיה של העמודה . באופן ספציפי, עיבוד נגזר יכול להשיג את המטרות הבאות:

1) ביצועי גילוי משופרים: על ידי הצגת קבוצות פונקציונליות שקל לאיתור, האנליטי מייצר אות חזק יותר על הגלאי, ומשפר את הרגישות והדיוק של הגילוי .
2) שנה את המבנה המולקולרי או הקוטביות: התאם את הקוטביות של האנליטי כדי לשפר את ההפרדה שלו בעמודה ולהפחית את השיא נגרר וחפיפה .
3) התנודתיות המוגברת: עבור כמה אנליטים שאינם נדיפים, נגזרת יכולה לשפר את התנודתיות שלהם, מה שמקל עליהם להפריד ולאתר בכרומטוגרפיה של גז {}}}
4) אנליטי יציב: קבוצות פונקציונליות רגישות באנליטי ניתן להגן על ידי נגזרת כדי למנוע השפלה או שינוי במהלך ההפרדה והגילוי .

► סוג הטיפול הנגזר
הגזירה מחולקת בעיקר לשני סוגים: נגזרת לפני העמודות וגזירה שלאחר העמודה:

1) נגזרת לפני העמוד:
לפני שהאנליטי נכנס לעמודה, הוא מגיב כימית עם הנגזרות לייצור הנגזרות .
לאחר מכן מופרדים את הנגזרים ומגלים בעמודה .
לגיזרת עמודות מראש יש יתרונות של תנאי תגובה חופשיים ותגובה מרובת שלבים קלה, אך היא עשויה גם להכניס זיהומים או לאבד דוגמאות .
2) נגזרת עמודת העמודה:
האנליטים מופרדים תחילה בעמודה הכרומטוגרפית ואז מגיבים כימית עם הנגזרים בתא הנגזרות .
לאחר מכן נכנסים לנגזרות המתקבלות לגלאי לגילוי .

לגזירה שלאחר העמודות היתרונות של השחזור טוב ופחות גורמים משפיעים, אך היא דורשת מכשירים וציוד נוספים .
► דוגמאות ליישום לעיבוד נגזר
בחילוץ והפרדה של רכיבים כימיים תרופתיים טבעיים, זה בשילוב עם טכנולוגיית עיבוד נגזרת יכול להשיג את היישומים הבאים:

1) רגישות לגילוי משופרת: לדוגמה, בניתוח חומצות אמינו, הצגת קבוצות פונקציונליות שניתנות לגילוי בקלות (כגון פלואורופורים) באמצעות נגזרת לפני העמודה יכולה להגביר את חוזק האות של חומצות האמינו בגלאי, ובכך לשפר את הרגישות של הגילוי.
2) שפר את אפקט ההפרדה: עבור תרכובות מסוימות עם קוטביות דומה או מבנה דומה, ניתן להתאים את הקוטביות על ידי טיפול בפיגוע, כך שניתן יהיה לשפר את השפעת ההפרדה על העמודה הכרומטוגרפית ., למשל, בניתוח הפילריות שלהם ניתן להכניס את השפעתן של הפולנואידים והמשתפקים את הפילריות שלהם {
3) הגנה על קבוצות פונקציונליות רגישות: לאנליטים המכילים קבוצות פונקציונליות רגישות (כגון הידרוקסיל פנולי, אמינו וכו '.), נגזרת יכולה להגן על קבוצות פונקציונליות אלה מפני השפלה או שינוי במהלך ההפרדה והגילוי על ידי פעילות תפקודית על ידי חלבון יכולות לניתוח על ידי חלבון יכולת לניתוח על ידי חלבון הידרוגיה על ידי חלבון הידרוגילציה על ידי חלבון הידרוסילציה. במהלך ההפרדה .